桉树随机引物PCR反应体系优化研究

作者:邓紫宇; 张照远; 项东云; 唐庆兰; 陈健波; 卢翠香; 叶露
来源:广西林业科学, 2012, (01): 23-26.
DOI:10.19692/j.cnki.gfs.2012.01.005

摘要

以桉树DNA为模板,采用单因素试验方法研究dNTP浓度、Mg2+浓度及退火温度对桉树随机引物PCR反应结果的影响。试验结果表明,最优的反应体系为:20μL的PCR反应体积中,10×Buffer2.0μL,Mg2+(25 mmol/L)1.28μL,dNTP(10 mmol/L)0.4μL,Primer(10μmol/L)2.0μL,Taq(5 U/μL)0.2μL,DNA2.0μL;最优扩增程序:94℃预变性2 min,然后进行35个循环(94℃变性30 s,36℃退火30 s,72℃延伸2 min),最后72℃延伸10 min。

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