大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)逆转录病毒周期蛋白(OrfA)相互作用蛋白的酵母双杂交筛选

作者：徐坤; 王亮亮; 张婷婷; 周罡; 张志强; 张智英

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2012, (03): 267-275.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2012.03.006

• 大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒
• 逆转录病毒周期蛋白(OrfA)
• 酵母双杂交
• E2F5转录因子 walleye dermal sarcoma virus(WDSV)
• retroviral-cyclin(OrfA)
• yeast two hybrid
• E2F5 transcription factor

大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤(WDS)在秋季发生春季萎缩的季节性生长特点与大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)辅助基因的表达有关.其中辅助基因orfA的表达产物OrfA蛋白可能是1个潜在的肿瘤相关因子,OrfA与细胞周期蛋白cyclin A和cyclin D同源,也被称为逆转录病毒周期蛋白(retroviral-cyclin).为了深入研究OrfA的作用和功能,我们构建了诱饵表达载体pGBKT7-orfA,采用酵母双杂交技术,从HeLa cDNA文库中筛选与其相互的蛋白因子.通过2轮高强度压力的筛选、β-半乳糖苷酶活性验证、回转验证以及测序分析,最终获得了1个与OrfA相互作用的转录因子E2F5.OrfA...

• 出版日期2012
• 单位西北农林科技大学