芪丹通脉片下调NLRP3炎症小体对巨噬细胞泡沫化进程的影响

作者：王南丁; 陈晋玉; 李成龙; 胡乔斌; 雷瑗琳; 张莎; 李哲^*

来源：环球中医药, 2022, 15(12): 2362-2367.

• 益气活血
• 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体
• 芪丹通脉片
• 泡沫化
• 炎症反应
• 动脉硬化
• 中药复方
• 巨噬细胞

目的 分别观察益气中药、活血中药、益气活血配伍中药芪丹通脉片对氧化低密度脂蛋白(oxidized low densitylipoprotein, ox-LDL)诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7细胞)泡沫化进程影响及其对泡沫化过程中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLR pyrin domain containing 3,NLRP3)炎症小体的影响。方法 培养后的RAW264.7细胞，随机分正常组、ox-LDL诱导组益气组、活血组、复方组及复方+siRNA组，泡沫化诱导经中药干预后的各组细胞，分析其油红染色阳性面积，计算泡沫化诱导率，收集细胞，酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)等炎性因子的表达水平，分别用实时荧光定量PCR(real-time PCR)及免疫印迹法(western blot, WB)分析手段分析NLRP3、半胱氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)的表达水平。结果 (1)对照组细胞几乎没有油红O着色，诱导后的各组细胞均出现不同程度的油红O着色，ox-LDL诱导组细胞油红着色面积比值最高，其余四组油红O着色面积比值与ox-LDL诱导组比较均降低均具有统计学意义，其中复方组及复方+siRNA组油红着色面积比值最低，与益气组及活血组比较均具有统计学意义。(2)对照组中IL-1β及IL-18含量最低，与对照组比较其它各组的IL-1β及IL-18含量均升高，益气组、活血组、复方组、复方+siRNA组与ox-LDL诱导组比较IL-1β及IL-18含量降低具有统计学意义，其中复方组与复方+siRNA组IL-1β及IL-18含量较益气组、活血组降低具有统计学意义。(3)对照组的NLRP3、Caspase-1含量最低；ox-LDL诱导组NLRP3、Caspase-1含量最高；药物干预的四组与ox-LDL诱导组相比，两个指标降低均具有统计学意义，其中复方组NLRP3、Caspase-1含量较益气组、活血组降低具有统计学意义。(4)ox-LDL诱导组NLRP3、Caspase-1含量最高，与ox-LDL诱导组比较，其它各组的NLRP3、Caspase-1含量均明显降低；其中复方组及复方+siRNA组NLRP3、Caspase-1的含量较益气组、活血组降低具有统计学意义。结论 益气活血复方芪丹通脉片能抑制NLRP3炎症小体表达、降低炎症反应、降低RAW264.7细胞泡沫化诱导率、抑制巨噬细胞泡沫化。

• 出版日期2022
• 单位第一临床医学院; 基础医学院; 陕西中医药大学; 西安市中医医院