MARCH1真核表达载体的构建及鉴定

作者：李菲; 陆江阳; 刘茜; 李新技

来源：Y201204009, 2012, (04): 297-299.

• MARCH1
• 质粒
• 真核表达载体 MARCH1
• plasmid
• eukaryotic expression vector

目的构建MARCH1真核表达载体并进行鉴定和纯化,为研究MARCH1在小鼠树突细胞(DCs)中的生物学作用奠定基础。方法从小鼠尾部提取cDNA作为模板,采用特异的引物,通过聚合酶链反应(PCR)扩增MARCH1cDNA片段,经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切,连接于载体pMB-HA质粒上,构建重组载体,经双酶切和DNA测序分析检测重组载体构建结果,转化大肠埃希菌DH5α感受态菌、筛选阳性克隆、抽提质粒并进行纯化。结果 PCR获得与预期大小一致(约3900bp)的cDNA片段,成功构建重组载体pMB-HA-MARCH1,双酶切及测序鉴定证实MARCH1 cDNA片段正确插入该真核表达载体中。结论成功...

• 出版日期2012
• 单位中国人民解放军军事医学科学院; 中国人民解放军空军总医院; 中国人民解放军总医院