抗黄曲霉毒素B_1单链抗体的表达载体的比较

作者：杨炼; 刘自琴; 刘蓉; 陈海琴; 陈卫; 张灏

来源：食品科学, 2010, 31(09): 171-176.

• 黄曲霉毒素
• 单链抗体
• 表达
• 大肠杆菌
• pET

目的:比较4种不同的pET载体在表达抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的单链抗体(scFv)克隆的特点,确定用以表达scFv-H4的合适载体。方法:将目的基因H4分别克隆到载体pET20b、pET22b、pET28a和pET32a上,分别转入大肠杆菌BL21(DE3)或Origami(DE3)中,比较诱导过程中细胞的生长状况和诱导结束后细胞破碎液中scFv-H4的生物活性以及细胞各部分包涵体。结果:pET20b和pET22b能表达具有生物活性的scFv-H4,这些具有生物活性的蛋白主要存在于周质中;pET28a和pET32a不能表达有生物活性的scFv-H4,而pET32a仅能在细胞质中产生大量的包涵体。结论:pET22b可能是表达AFB1的单链抗体较优的表达载体。

• 出版日期2010
• 单位食品科学与技术国家重点实验室; 江南大学