黑曲霉葡萄糖氧化酶基因的原核表达及其蛋白产物的Western-blot分析

作者：安玉麟; 孙瑞芬; 张鹤龄; 郭树春; 闫素丽

来源：华北农学报, 2009, (04): 84-87.

• 黑曲霉3.758
• 葡萄糖氧化酶基因
• 融合表达
• 抗血清
• ELISA
• Western-blot Aspergillus niger 3.758
• Glucose oxidase gene
• Fusion expression
• Antiserum
• ELISA
• Western-blot

为进一步研究黑曲酶中国株3.758葡萄糖氧化酶(GOD)在大肠杆菌中的表达水平和条件,将黑曲霉中国株3.758的葡萄糖氧化酶(GOD)基因定向克隆于原核表达载体pET-11a上,构建了融合表达的重组质粒pET/GO,转化E.coliBL21(DE3)plysS,用IPTG诱导,超声波粉碎细菌细胞,SDS-PAGE电泳检测,GOD基因获得了表达,表达的融合蛋白相对分子质量为66.5 kDa。用市售葡萄糖氧化酶免疫家兔获得抗血清,酶联法(ELISA)测定其效价为106,West-ern-blot分析证明表达的融合蛋白与兔抗GOD血清有较强的特异性,为黑曲霉3.758葡萄糖氧化酶(GOD)抗体的制备...

• 出版日期2009
• 单位内蒙古自治区农牧业科学院; 内蒙古农业大学; 内蒙古大学