科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 准确估算血迹离体时间能为刑事案件调查提供信息或线索。本文利用qPCR技术检测血迹中RNA的降解情况，进而筛选并评估适用于血迹离体时间推断的内参基因（reference genes）。方法 本研究制备10名志愿者0～90 d区间范围内7个时间节点共70份样本的总RNA为实验材料，基于其中6名志愿者的样本的qPCR数据，使用geNorm和NormFinder算法对14个候选内参基因（let-7g-5p, let-7i-5p, miR-191-5p, miR-484, miR-103a-5p,miR-423-5p, PPIA, ACTB, 5SrRNA, 18SrRNA, miR-93-5p, U6b, SNORD24, SNORD38B）进行稳定性评估，筛选内参基因及其使用方案。选取全部10名志愿者70份样本，验证内参基因及其使用方案的校正效果。结果 qPCR检测显示miRNA在血迹离体后90 d范围内表现出的稳定性较强。综合使用geNorm和NormFinder两种算法获得的内参基因使用方案为：以let-7g-5p为单基因内参，或以let-7g-5p、U6b和miR-191-5p组合为三内参基因。70个样本对两个内参基因使用方案的校正能力验证显示，多基因组合内参方案的三次方程模型能更准确推断血液斑迹的离体时间。结论 本研究首先推荐以ACTB为标记，以let-7g-5p、U6b、miR-191-5p组合的三内参基因三次方程校正模型用于血迹离体时间推断检验鉴定技术研发；在考虑提高检验效率、简化实验流程等需求而需要选择单基因作为内参基因时，可以选择ACTB为标记，使用let-7g-5p为内参基因的三次方校正模型。
- 出版日期2023
- 单位生命科学技术学院; 华中农业大学
