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摘要
目的观察可溶性环氧化物水解酶抑制剂t-AUCB对小鼠巨噬细胞泡沫化及胆固醇流出率的影响,明确t-AUCB是否可抑制泡沫细胞的形成。方法培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,分组为空白对照组、不同浓度t-AUCB干预组、100 txmol/L t-AUCB+GW9662组。t-AUCB干预组再分为4个亚组,分别用不同浓度t-AUCB(1,10,50,100 xmol/L)干预24 h。100μmol/L t-AUCB+GW9662组为在t-AUCB前1 h加入过氧化物酶增殖体激活型受体γ(PPAR7)拮抗剂GW9662 5μmol/L。采用油红O染色鉴定泡沫细胞的形成,液体闪烁计数器检测各组细胞~3氚标记胆固醇(~3H-Cholester01)的流出率。实时PCR和免疫印迹法分别测定巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ABCAl)mRNA和蛋白的表达。结果油红O染色24 h后,空白对照组细胞大量红染,t-AUCB组细胞红染明显少于空白对照组(P<0.05)。100μmol/L t-AUCB+GW9662组细胞大量红染,显著多于100/xmoL/Lt-AUCB组(P<0.05)。空白对照组胆固醇流出率为(5.91±0.18)%。1、10、50和100μmoL/Lt-AUCB干预组胆固醇流出率分别为(7.03±0.33)%、(8.05±0.32)%、(9.04±0.14)%和(10.06±0.85)%,均明显高于空白对照组(P均<0.05)。100μmol/L t-AUCB+GW9662组胆固醇流出率为(6.33±0.15)%,明显低于100 ixmoL/L t-AUCB组,P<0.05。各浓度t-AUCB干预组小鼠巨噬细胞ABCAl mRNA和蛋白表达均明显高于空白对照组,P均<0.05,100 ixmoL/L t-AUCB+GW9662组ABCAl mRNA和蛋白表达显著低于100 ~mol/L t-AUCB组,P<0.05。结论 t-AUCB可通过PPARγ-ABCAl途径改善巨噬细胞胆固醇流出,抑制巨噬细胞内胆固醇过度蓄积,从而抑制泡沫细胞的形成。
- 出版日期2012
- 单位中南大学湘雅二医院
