口蹄疫病毒A型AF/72株衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定

作者：张庆勋; 刘新生; 方玉珍; 王永录; 张永光

来源：安徽农业科学, 2015, 43(26): 21-72.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.26.142

• 口蹄疫病毒
• 衣壳蛋白
• 检测

通过限制性酶切位点将P12A和3C基因插入到带有双启动子(Pp10和PPH)的杆状病毒表达载体p Fast BacTMDual,转化E.coli DH10感受态细胞进行蓝白斑筛选,将鉴定正确的重组杆状病毒质粒转染Sf9细胞后收获重组杆状病毒r Bac-Dual-P12A3C,通过间接免疫荧光(IFA)和蛋白质印迹(Western-blot)检测衣壳蛋白的表达。IFA结果表明表达产物能够被A型FMDV猪抗阳性血清所识别,鉴定正确并具有良好反应原性。Western-blot检测到81 k D(P12A)、57 k D(VP0+VP3)、47 k D(VP3+VP1)、33 k D(VP0)和24 k D(VP1/VP3)5条蛋白条带,与预期相符。该研究为进一步研究A型口蹄疫病毒空衣壳的体外组装提供了试验依据。

• 出版日期2015
• 单位家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所