大鼠LC3蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

作者：倪志华; 张瑞英; 张玉明; 周艳芬

来源：中国医药工业杂志, 2011, (10): 739-741.

• 微管相关蛋白1轻链3-β
• 原核表达
• 多克隆抗体
• 制备 microtubule-associated protein 1 light chain 3-β(LC3)
• prokaryotic expression
• polyclonal antibody
• preparation

微管相关蛋白1轻链3-β(LC3)在哺乳动物细胞中定位于自噬泡上,可作为一种特定的标记用来检测自噬。从SD大鼠脑组织提取总RNA,经RT-PCR扩增得到LC3全长编码基因,并克隆到pMD1 8-T载体。以测序验证正确的重组子为模板扩增LC3基因,并构建pUC18-LC3重组质粒,将其转化到E.coli BL21(DE3)中。SDS-PAGE结果表明,菌体诱导后形成包涵体形式的表达产物,以电泳回收目的蛋白并免疫新西兰白兔,获得大鼠LC3蛋白多克隆抗体。western blot结果显示,制备的多克隆抗体可特异性识别LC3蛋白。

• 出版日期2011
• 单位河北大学