抗人CD28鼠-人嵌合抗体的构建及瞬时表达

作者：程钢; 陈永井; 马震宇; 费敏; 孙中文; 徐耀瑜; 胡玲玲; 邱玉华

来源：复旦学报(医学版), 2007, 34(4): 482-485.

DOI：10.3969/j.issn.1672-8467.2007.04.002

• CD28
• 单克隆抗体
• 嵌合抗体
• 瞬时表达

目的 构建及瞬时表达抗人CD28鼠-人嵌合抗体.方法 采用基因工程技术,从分泌鼠抗人CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株(克隆号:2F5)中克隆出抗体重链和轻链可变区基因及相应信号肽编码序列.分别与人免疫球蛋白IgG1恒定区重、轻链基因拼接,构建含有重组基因的pIRES表达质粒pIRES/h2F5.转染293T细胞并用抗性药物G418选择培养.采用流式细胞术,检测瞬时转染细胞后嵌合抗体的表达情况.结果 抗人CD28鼠人嵌合抗体得到表达并能与CD28分子特异性结合.结论 抗人CD28鼠-人嵌合抗体的构建和瞬时表达是成功的,为后续构建稳定分泌抗人CD28鼠-人嵌合抗体的CHO基因转染细胞株奠定了基础.

• 出版日期2007
• 单位苏州大学