摘要

目的 基于细胞外信号调节激酶(ERK)1/2-核因子-κB(NF-κB)信号通路探讨葛根素在缺氧/复氧损伤心肌细胞中的作用机制。方法 心肌细胞H9C2分成对照组、模型组(缺氧/复氧模型)、实验低剂量组(缺氧/复氧模型,180μmol·L-1葛根素处理)、实验高剂量组(缺氧/复氧模型,360μmol·L-1葛根素处理)、实验高剂量+表皮生长因子(EGF)组(缺氧/复氧模型,360μmol·L-1葛根素、ERK1/2激动剂EGF处理)、实验高剂量+EGF+二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)组(缺氧/复氧模型,360μmol·L-1的葛根素、ERK1/2激动剂EGF、NF-κB信号抑制剂PDTC处理)。以蛋白质印迹法检测p-p65/p65、p-ERK1/2/ERK1/2、细胞色素C蛋白表达,以细胞计数试剂盒-8法检测细胞增殖情况,以流式细胞术检测细胞凋亡情况,以黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)含量,以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯法检测活性氧(ROS)含量,以JC-1法检测线粒体膜电位。结果 对照组、模型组、实验低剂量组和实验高剂量组心肌细胞中p-p65/p65蛋白表达量分别为0.16±0.02,0.37±0.03,0.28±0.02,0.21±0.03,p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达量分别为0.29±0.04,0.54±0.03,0.44±0.04,0.32±0.03,模型组与对照组相比,实验低剂量组、实验高剂量组与模型组相比,实验高剂量组与实验低剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、模型组、实验低剂量组、实验高剂量组、实验高剂量+EGF组、实验高剂量+EGF+PDTC组增殖活力(OD值)分别为0.58±0.09,0.35±0.05,0.44±0.04,0.52±0.04,0.40±0.03,0.49±0.05,细胞凋亡率分别为(5.20±0.70)%,(20.32±2.08)%,(13.68±1.22)%,(8.12±0.65)%,(17.16±1.23)%,(10.06±1.21)%,模型组的上述指标与对照组相比,实验低剂量组、实验高剂量组的上述指标与模型组相比,实验高剂量组的上述指标与实验低剂量组相比,实验高剂量+EGF组的上述指标与实验高剂量组相比,实验高剂量+EGF+PDTC组的上述指标与实验高剂量+EGF组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 葛根素通过抑制ERK1/2-NF-κB信号减少缺氧/复氧损伤心肌细胞凋亡。

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