多浪绵羊骨骼肌卫星细胞的分离培养、鉴定及成肌诱导分化

作者：赵谦; 张萍; 李向臣; 关伟军; 浦亚斌; 赵倩君; 马月辉

来源：中国畜牧兽医, 2016, 43(11): 2956-2962.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.11.022

• 绵羊
• 骨骼肌卫星细胞
• 分离培养
• 成肌分化

为了在体外细胞水平模拟多浪绵羊肌肉生长发育过程,本研究以多浪绵羊为试验动物,采用胶原酶和胰酶两步酶消化法分离多浪绵羊骨骼肌卫星细胞(satellite cells,SCs),并利用差速贴壁的方法纯化分离得到的SCs。利用免疫荧光技术检测SCs标记基因Desmin、Pax7和MyoD1的表达情况,鉴定分离得到的SCs。采用血清撤离的方法诱导SCs向成肌方向分化。通过显微镜观察和成肌分化标记基因肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)的免疫荧光,检测肌管的形成情况。通过对SCs标记基因Desmin、Pax7和MyoD1的免疫荧光鉴定,确认本研究成功分离得到多浪绵羊SCs。采用血清撤离的方法诱导SCs成肌分化,显微镜观察和MHC免疫荧光可以明显观察和检测到肌管的形成。本研究对多浪绵羊SCs成功地进行了分离和鉴定,并建立了体外培养条件下多浪绵羊SCs的成肌诱导分化。

• 出版日期2016
• 单位中国农业科学院北京畜牧兽医研究所