低氧诱导因子和角质细胞生长因子双基因重组腺病毒的构建及其在肺泡上皮细胞中的表达

作者：哈小琴; 姜东红; 邓芝云; 董菊子; 赵勇; 彭俊华; 张玉; 张玉琴; 王鲲

来源：现代生物医学进展, 2013, (32): 6249-6254.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2013.32.003

• 低氧诱导因子-lα
• 角质细胞生长因子
• 基因
• 腺病毒
• 构建
• 表达 Hypoxia inducible factor 1αgene
• Keratinocyte growth factor gene
• Adenovirus
• Construction
• Expression

目的:构建同时携带低氧诱导因子-lα(HIF-lα)和角质细胞生长因子(KGF)的腺病毒载体(pAdxsi-GFP-HIF-KGF),观察其在防治肺损伤潜在的应用前景。方法:低氧处理A549细胞后提取总RNA并逆转录为cDNA作为模板,依据GeneBank公布的HIF-1αcDNA设计引物,并分别引入KpnI和BamHI酶切位点,PCR扩增后将目的基因HIF-1α连接到载体pShuttle-CMV-EGFP上,构建重组质粒pShuttle-GFP-HIF。然后以质粒pIRES2-EGFP-KGF为模板,用引入NheI和PmeI酶切位点的引物PCR扩增KGF基因并克隆到重组质粒pShuttle-...

• 出版日期2013
• 单位中国人民解放军兰州军区兰州总医院