一步法SYBR Green实时定量RT-PCR检测坦布苏病毒方法的建立

作者：**涛; 李银; 赵冬敏; 刘宇卓; 黄欣梅; 杨婧; 韩凯凯; 安凤娇

来源：江苏农业学报, 2015, (04): 829-833.

• 坦布苏病毒
• 实时定量RT-PCR
• NS2A基因 Tembusu virus
• real-time RT-PCR
• NS2A gene

为建立快速检测坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)的一步法SYBR Green实时定量RT-PCR方法,本研究根据TMUV NS2A基因的保守序列,设计并合成了1对特异性引物,以体外转录的NS2A基因作为标准品,采用一步法实时定量RT-PCR方法检测TMUV。结果显示该方法标准曲线的决定系数为0.997,具有良好的线性关系;灵敏度为1μl 10拷贝,是常规RT-PCR方法的100倍;并且与其他病毒无交叉反应,批内和批间变异系数分别为0.11%~0.30%和0.88%~1.31%,具有良好的特异性和稳定性。该方法对于TMUV人工感染鸭泄殖腔棉拭子的检测阳性率为100%,而常规RT-...

• 出版日期2015
• 单位江苏省农业科学院