橡胶树肌动蛋白解聚因子原核表达及纯化

作者：邓治; 杜磊; 李德军

来源：热带作物学报, 2014, (02): 277-281.

DOI：10.3969/j.issn.1000-2561.2014.02.012

• 肌动蛋白解聚因子
• 橡胶树
• 原核表达
• 蛋白纯化
• Western blot Actin depolymerizing factor
• Rubber tree
• Prokaryotic expression
• Pprotein purification
• Western blot

本研究根据HbADF序列设计引物扩增基因的编码区,并将其插入到原核表达载体pET28a上,成功构建重组质粒pET28a-HbADF。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌,经1 mmol/L IPTG诱导,获得相对分子量为20 ku的融合蛋白。表达蛋白以可溶和包涵体两种形式存在,通过亲和层析方法纯化可溶蛋白并获得HbADF融合蛋白,用抗HIS标签的单抗对纯化蛋白进行了Western blot鉴定。该结果为进一步研究HbADF蛋白特性及功能奠定基础。

• 出版日期2014
• 单位中国热带农业科学院橡胶研究所; 三峡大学; 生命科学学院; 农业部