摘要

为建立一套可以较好地分离油菜不同器官(花蕾、化药、叶片)的双向电泳技术体系,对IPG胶条的pH范围、凝胶染色的方法以及蛋白质的上样量进行优化.结果表明,以pH=47,17cm的IPG胶条进行双向电泳,胶体考马斯亮蓝染色,蛋白质上样量为800μg时,油菜的花蕾、化药以及叶片蛋白质均可得到很好的分离,获得的2-DE凝胶图谱清晰.为检验优化后的双向电泳技术体系与质谱的兼容性,选取10个蛋白质点进行肽质量指纹图谱分析,发现这些蛋白质点经质谱分析后均可得到成功鉴定.表明该分离体系与质谱兼容性较好,蛋白质点鉴定成功率较高.