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摘要
目的:研究大黄素(EM)对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,并探讨EM是否通过Notch信号通路达到抗肿瘤作用。方法:MTT比色法检测10、20、40、60、80μmol/L浓度EM作用于PC3细胞12、24、36、48、72、96h后细胞活性;24h后流式细胞仪测定细胞周期及凋亡的变化,透射电镜观察细胞超微结构变化;RT-PCR和Western Blot检测PC3细胞内Notch1、Jagged1、VEGF和bFGF mRNA和蛋白的表达;激光共聚焦显微镜免疫荧光分析法评价Notch1蛋白的表达水平和亚细胞定位分布。结果:EM能显著抑制PC3细胞的生长,呈剂量与时间依赖性,不同浓度EM组之间及不同时间组之间差异均有统计学意义(P<0.01);PC3细胞出现有EM剂量依赖性G2/M期阻滞(P<0.01),且各浓度组凋亡细胞比例均显著高于空白对照组(P<0.01),差异有统计学意义;EM作用24h后PC3细胞出现凋亡形态学改变;PC3细胞内Notch1 mRNA和蛋白表达均上升,Jagged1、VEGF、bFGF mRNA和蛋白的表达呈剂量依赖性降低;激光共聚焦检测结果显示PC3细胞中Notch1不仅有胞膜、胞浆定位,胞核也有少量表达,随EM浓度升高胞核内表达增加。结论:EM能显著抑制PC3细胞的生长,促进凋亡;并促进其G2/M期阻滞;Notch1的表达和核易位激活引起VEGF、bFGF表达明显降低,可能是EM抑制前列腺癌细胞生长转移的机制之一。
- 出版日期2014
- 单位杭州市第一人民医院; 南京医科大学
