可视化基因芯片技术检测肠道病毒方法的建立

作者：彭贤慧; 刘琪琦; 陈苏红; 刘志红; 张敏丽; 宋宏彬; 王升启

来源：军事医学, 2012, 36(04): 299-303.

• 肠道病毒
• 基因芯片
• 多重不对称PCR
• 可视化 enterovirus
• DNA microarray
• multiplex asymmetric PCR
• visualization

目的建立一种能同时检测10种肠道病毒的可视化基因芯片法。方法根据公开发表的10种常见肠道病毒的序列,设计病毒引物和探针,制备肠道病毒检测基因芯片。利用多重不对称PCR法扩增样品中的病毒靶片段,标记产物与基因芯片上的探针杂交,经清洗、可视化显色后进行结果分析。在优化的RT-PCR体系、杂交反应和可视化检测条件下,评价芯片的特异性、灵敏度和重复性。结果本研究共筛选出2对通用引物、3对特异性引物和1条肠道病毒属通用探针、9条特异性检测探针。该芯片具有较好的特异性和重复性,可检测出不低于102拷贝/μl的体外转录RNA。30例临床标本的芯片检测结果与荧光PCR法一致。结论本研究所建立的方法具有高通量、...

• 出版日期2012
• 单位军事医学科学院; 军事医学科学院放射与辐射医学研究所; 解放军总医院