抗肿瘤免疫基因治疗剂pVAX-IL-12-GB的构建及体内外表达验证

作者：董金凯; 高江平; 阎瑾琦; 张亮; 肖毅; 王伟; 王晓雄; 于继云

来源：南方医科大学学报, 2012, (06): 760-765.

• 肿瘤
• 免疫基因治疗
• IL-12
• GM-CSF
• B7.1
• 电穿孔
• 体内外表达 tumor
• immunogene therapy
• interleukin-12
• granulocyte-macrophage colony stimulating factor
• B7.1
• electroporation

目的构建能够同时表达人免疫调节因子IL-12,GM-CSF和B7.1的新型抗肿瘤免疫基因治疗剂pVAX-IL-12-GB,验证以上免疫调节因子基因在293T细胞的表达以及IL-12基因在活体内的表达。方法将人IL-12基因克隆到早期构建好的pVAX-IRES-GM-CSF-B7.1真核表达质粒的上游,将其构建成为pVAX-IL-12-GB重组质粒;利用脂质体法瞬时转染293T细胞,RT-PCR检测IL-12和GM-CSF-B7.1基因的转录,ELISA法检测细胞上清中上游IL-12基因和下游GM-CSF基因的蛋白表达,流式细胞术及免疫荧光检测下游B7.1基因的表达;利用电穿孔方法递送质粒进入小...

• 出版日期2012
• 单位军事医学科学院基础医学研究所; 中国人民解放军总医院