ISO通过CaMKⅡ和PKA激活RyR2诱发心肌细胞凋亡

作者：张旭; 王伟; 汪和贵^*

来源：沈阳医学院学报, 2023, 25(02): 121-126.

DOI：10.16753/j.cnki.1008-2344.2023.02.003

• 异丙肾上腺素
• 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ
• 蛋白激酶A
• 兰尼碱受体2
• 细胞凋亡

目的：探讨异丙肾上腺素（ISO）持续激活Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）和蛋白激酶A (PKA)后对心肌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：将H9C2心肌细胞分为Control组、ISO组、ISO+KN93 (CaMKⅡ抑制剂)组、ISO+H-89 (PKA抑制剂)组，经不同药物干预后，通过CCK-8法检测心肌细胞活力，Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒和流式细胞术检测心肌细胞凋亡，Western blot法检测CaMKⅡ、PKA、兰尼碱受体2 (RyR2)及凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Bax、Bcl-2的表达情况，荧光显微镜观察细胞形态变化和钙荧光强度。结果：与Control组比较，ISO组细胞活性降低，CaMKⅡ、PKA和RyR2的磷酸化水平增加，凋亡蛋白Cleaved-Caspase3、Bax/Bcl-2表达增加，胞内钙含量增多，细胞凋亡率增多，差异均有统计学意义（P<0.01）；与ISO组比较，ISO+KN93和ISO+H-89组细胞活性增高，CaMKⅡ、PKA和RyR2的磷酸化水平降低，凋亡蛋白Cleaved-Caspase3、Bax/Bcl-2表达减少，胞内钙含量减少，细胞凋亡率减少，差异均有统计学意义（P<0.01）。结论：ISO通过CaMKⅡ和PKA共同介导RyR2途径的磷酸化激活，并诱发心肌细胞凋亡。

• 出版日期2023
• 单位中心实验室; 皖南医学院弋矶山医院