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摘要
目的：研究经典Wnt信号通路在间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSC)诱导成熟树突状细胞(Mature dendritic cells，maDC)分化为调节性DC (regulatorydendriticcell，DCreg)治疗ARDS的作用。 方法：无菌分离诱导C57BL/6小鼠骨髓来源树突状细胞，用脂多糖lOOng／ml刺激48h诱导mDC产生；后将mDC与MSC共培养15天诱导DCreg产生，用Dickkopf-1(DKK1)20ng/ml抑制Wnt信号通路；实验分mDC组（空白组）、MSC+mDC组（对照组）、MSC+mDC+DKK1组（实验组），检测以下指标：①流式法检测DC细胞表面分子的表达；②采用卵白蛋白-异硫氰酸荧光素(OVA-FITC)法检测DC吞噬功能力；③Elisa法检测DC炎症因子的分泌；④用CCK8检测DC与CD4+T淋巴细胞共培养5天后CD4+T淋巴细胞增殖指数；⑤Western blot法检测DC细胞内Wnt信号通路相关蛋白的表达。 结果：①较空白组，对照组高表达CDllb及B220，低表达CDllc、MHCII分子及共刺激分子CD86、CD40;②较空白组，对照组吞噬OVA-FITC能力增强；③较空白组，对照组分泌抑制性炎症因子IL-10及TGF-β增加，促炎因子IL-12减少；④较空白组，对照组刺激CD4+T淋巴细胞增殖能力降低；⑤较空白组，对照组胞浆中p-GSK/t-GSK比例增加，细胞核内β-catenin表达亦增加。用DKK120ng/ml抑制Wnt信号通路后，与对照相比，实验组胞浆中p-GSK/t-GSK比例减少，细胞核内β-catenin减少；⑥抑制Wnt信号通路后对DC细胞免疫学功能影响：与对照组相比，实验组分泌抑制性炎症因子IL-10及TGF-B减少，促炎因子IL-12分泌增多；较对照组，实验组刺激CD4+T淋巴细胞增殖能力增强。 结论：MSC能够诱导mDC向DCreg分化。经典Wnt信号通路可能参与MSC诱导mDC向调节性DC分化的过程。
- 出版日期2016
- 单位东南大学附属中大医院
