高效小鼠CD40siRNA基因片段的筛选及对淋巴细胞CD40基因表达的影响

作者：严金川; 杨萍; 龚杰; 王标; 徐良洁

来源：江苏大学学报(医学版), 2010, (06): 476-480.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.2010.06.006

• 小分子RNA干扰
• 淋巴细胞
• CD40
• 反向转染 small interfering RNA(siRNA)
• lymphocytes
• CD40
• reverse transfection

目的:应用RNA干扰技术筛选高效小鼠CD40siRNA基因序列片段。方法:体外化学合成小鼠CD40基因为靶标的siRNA3对(siCD40-1、siCD40-2、siCD40-3),通过脂质体瞬时转染小鼠脾淋巴细胞(实验组),并分别以转染无关siRNA片段及未转染细胞作为对照(对照组)。分别采用流式细胞术、实时荧光定量PCR检测转染24 h细胞表面CD40抗原、CD40 mRNA表达,蛋白质印迹检测转染48 h蛋白表达的变化。结果:与对照组相比,实验组CD40抗原表达、CD40 mRNA及蛋白表达明显下降(P<0.01);3对实验组siRNA能明显抑制CD40基因表达,抑制率分别为69%、78...

• 出版日期2010
• 单位江苏大学