基于神经干细胞微环境研究川芎嗪对OGD损伤下神经元新生的促进作用

作者：邢婉青; 宋孝雄; 王雪晴; 卢金福; 吕高虹; 阮鸣^*; 喻斌^*

来源：中国药理学通报, 2023, 39(04): 731-738.

• 川芎嗪
• 神经元新生
• 神经干细胞微环境
• 神经干细胞
• 星形胶质细胞
• 脑微血管内皮细胞

目的 在构建体外神经干细胞微环境的基础上研究川芎嗪(tetramethylpyrazine, TMP)对氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation, OGD)损伤下神经元新生的促进作用。方法 分别原代培养神经干细胞(NSCs)、星形胶质细胞(ACs)、脑微血管内皮细胞(BMECs),建立NSCs微环境体外模型后，以NSCs活性对OGD造模条件进行优化，以尼氏染色对TMP给药浓度进行优化，随后采用CCK-8、Nestin+/DAPI+免疫荧光法检测NSCs增殖情况；放射性迁移、划痕修复实验检测NSCs迁移情况；β3-Tubulin+/DAPI+、GFAP+/DAPI+检测NSCs分化；以跨膜电阻阻值反应体外血脑屏障结构的完整性。结果 NSCs活性随着OGD造模时间延长而降低，选择OGD 6 h为后续造模时间，此时细胞活性降低至60.72%。在TMP给药浓度优化中发现5～50 mg·L-1范围具有明显量效关系，故以此为后继实验浓度。与模型组相比，3个浓度的TMP均可明显增加NSCs活性、Nestin+/DAPI+阳性细胞数以及β3-Tubulin+/DAPI+阳性细胞数，10、50 mg·L-1的TMP可延长放射性迁移距离，50 mg·L-1的TMP还可促进NSCs的划痕修复并减少GFAP+/DAPI+阳性细胞数。但3个浓度对跨膜电阻均无明显效果。结论 TMP对体外NSCs微环境中NSCs的活性、增殖、迁移均有较好的促进作用，此外，在减少ACs方向化生的同时，还促进了神经元新生。

• 出版日期2023
• 单位南京中医药大学; 南京晓庄学院