口蹄疫病毒3D聚合酶B细胞表位的筛选鉴定

作者:张昱; 王永录; 张永光; 潘丽; 方玉珍; 刘力宽; 蒋守田; 吕建亮; 张中旺; 张淑刚; 李正丰; 杜进鑫
来源:华北农学报, 2009, (03): 69-73.

摘要

以口蹄疫病毒株AF72 RNA为模板,反转录并扩增3D聚合酶基因,PCR纯化产物与pGEM-T easy载体连接并转化JM109菌株,对经凝胶电泳、PCR和EcoRⅠ酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序,通过序列比对获得AF723D聚合酶的核苷酸序列和推导氨基酸序列,综合分析3D聚合酶的亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数,预测其潜在B细胞抗原表位并人工合成表位肽段,利用间接ELISA对潜在表位进行筛选鉴定,结果显示,表位3D2和3D4为病毒株AF72 3D聚合酶的优势B细胞表位,该结果将为进一步的FMDV多表位疫苗研究奠定基础。