敲低高迁移率族蛋白B1(HMGB1)抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖并促进其凋亡

作者：李佳; 庄乙君; 李军; 陈文^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2019, 35(06): 512-517.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008823

• 高迁移率族蛋白B1(HMGB1)
• 高糖
• 肾小球系膜细胞
• 核因子κB (NF-κB)
• 核因子κB抑制物α(IκBα)
• 炎症反应

目的探讨敲低高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞(GMC)增殖的影响及机制。方法培养大鼠GMC,分为正常组、高糖处理组、阴性对照小干扰RNA联合高糖处理组(siRNA-NC-高糖组)、 HMGB1小干涉RNA联合高糖处理组(siRNA-HMGB1-高糖组)。正常组GMC用正常DMEM培养基培养;高糖处理组GMC换用高糖DMEM培养基培养; siRNA-HMGB1-高糖组GMC转染siRNA-HMGB1序列6 h后,用高糖培养液培养24 h; siRNA-NC-高糖组GMC转染siRNA-NC序列6 h后,用高糖培养液培养24 h。实时荧光定量PCR检测GMC中HMGB1 mRNA水平, MTT法检测GMC增殖情况,流式细胞术检测GMC凋亡情况, Western blot法检测GMC中HMGB1、核因子κBp65 (NF-κBp65)和核因子κB抑制物α(IκBα)蛋白水平, ELISA检测细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果与siRNA-NC-高糖组或单纯高糖组相比, siRNA-HMGB1-高糖组GMC中HMGB1 mRNA水平降低,在处理24、 48、 72、 96 h, GMC增殖活性和细胞凋亡率降低;敲低GMC的HMGB1水平后,细胞NF-κBp65蛋白水平降低、 IκBα蛋白水平增加,且上清液中IL-1β、 IL-6和TNF-α水平降低。结论敲低GMC的HMGB1水平抑制高糖诱导的GMC增殖,并促进其凋亡,可能与抑制NF-κB/IκBα通路有关。

• 出版日期2019
• 单位海南医学院第二附属医院