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摘要
【目的】体外筛选抗石斑鱼虹彩病毒（Singapore grouper iridovirus,SGIV）的药物，为石斑鱼虹彩病毒病防控提供理论依据。【方法】应用石斑鱼脾脏组织细胞系（Grouper spleen,GS）-SGIV感染模型，从4种药物[盐酸金刚烷胺（AMA）、更昔洛韦（GCV）、绿原酸（CGA）和黄芩苷（BI）]中筛选有效的体外抗SGIV药物。通过显微镜观察和细胞活力检测不同药物对GS细胞的毒性，确定不同药物对GS细胞的安全工作浓度后，通过实时荧光定量PCR、蛋白印迹分析等探究药物对SGIV感染复制的调节作用。【结果】细胞活力检测结果显示，4种药物AMA、GCV、CGA和BI处理GS细胞的最高安全工作浓度分别为200、200、1600和40μg/mL。显微镜下观察发现，AMA和GCV处理GS细胞后对SGIV感染的细胞病变效应（Cytopathic effect,CPE）进程有明显的抑制作用，而CGA和BI没有明显抑制效果。实时荧光定量PCR检测结果显示，AMA和GCV处理可显著降低SGIV主要衣壳蛋白（Major capsid protein,MCP）和病毒囊膜蛋白（Viral protein VP088）的基因转录（P<0.05，下同）。蛋白印迹分析表明AMA和GCV对SGIV的MCP蛋白合成具有明显抑制效果。倒置荧光显微镜观察发现AMA和GCV处理明显减少感染过程中病毒加工厂的形成，提示AMA和GCV可能影响病毒装配。病毒滴度测定结果显示，AMA和GCV处理可显著降低SGIV感染过程中子代病毒的产量。【结论】应用SGIV体外感染模型筛选到的2种药物AMA和GCV具有一定的抗SGIV活性，且这种抗病毒能力主要通过抑制病毒的基因转录和蛋白合成，从而影响病毒的装配和产量。
- 出版日期2023
- 单位华南农业大学
