Angeli盐对二氢硫辛酰胺脱氢酶的可逆性灭活作用(英文)

作者：晏良军; 刘莉; Michael J Forster

来源：生物物理学报, 2012, 28(04): 341-350.

• Angeli盐
• 二氢硫辛酰胺脱氢酶
• 线粒体
• 硝基阴离子(HNO)
• S-硝基化作用

二氢硫辛酰胺脱氢酶(dihydrolipoamide dehydrogenase,DLDH)是线粒体3个α-酮酸脱氢酶复合物(丙酮酸脱氢酶复合物、α-酮戊二酸脱氢酶复合物、支链氨基酸脱氢酶复合物)的关键成分,属于吡啶依赖性二硫化物氧化还原酶类,对活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)和活性氧自由基(reactive oxygenspecies,ROS)造成的氧化修饰非常敏感。本研究探索由Angeli盐所产生的RNS对DLDH的修饰作用及机制。将大鼠脑线粒体分离,与不同浓度的Angeli盐作用,应用分光光度计、蓝色胶、基于二维电泳的蛋白质组学等手段,测定DLDH酶活性。结果显示,Angeli盐呈浓度依赖性方式灭活DLDH,过氧亚硝酸盐在同样条件下对DLDH酶活性无抑制作用,说明Angeli盐对DLDH的作用可能是非随机的。由于Angeli盐在生理pH条件下可分解为硝基阴离子(nitroxyl anion,HNO)和一氧化氮(nitric oxide,NO),故进一步分析了Angeli盐对DLDH的灭活作用是否由HNO引起,结果证实确实如此。最后,二维电泳Western blot结果显示,Angeli盐对DLDH的灭活伴随着DLDH蛋白质的S-亚硝基硫醇形成,提示S-亚硝基硫醇化可能是导致DLDH酶失活的原因。综上,本研究为研究Angeli盐灭活DLDH的机制提供了新证据。

• 出版日期2012
• 单位南京医科大学第一附属医院