摘要

目的:建立基于焦磷酸测序技术(Pyrose-quencing)的高通量的CYP2C9*3突变检测方法。方法:应用带有生物素标记的扩增引物,经PCR扩增及Beads分离,制备该突变位点焦磷酸测序单链模板,并在PyroMark ID焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,以经典ABI测序法测序结果作为标准对照,观察批量分析的可靠性并批量检测220例人DNA标本。结果:建立了基于焦磷酸测序技术的CYP2C9*3突变位点检测平台,实现了DNA标本的高通量检测。能一次获得96份DNA的CYP2C9*3突变位点检测结果。经重复性检测和标准的ABI测序可靠性检测,CYP2C9*3突变位点的突变检出率及重复率均达100...