沉默肝脏X受体β表达对BV2小胶质细胞极化的影响

作者：吕柯毅; 张丹丹; 骆燚; 陈胜; 姜鑫; 范晓棠^*; 陈红^*

来源：免疫学杂志, 2022, 38(02): 93-115.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20220014

• 肝脏X受体β
• BV2小胶质细胞
• M1
• M2

目的探讨沉默肝脏X受体β(LXRβ)对BV2小胶质细胞M1/M2表型变化和炎症因子释放的影响。方法通过RNA干扰技术沉默小鼠小胶质细胞株(BV2)中LXRβ的表达。实验分为siRNA-NC组(siRNA无关序列对照组)、siRNA-LXRβ组(转染siRNA-LXRβ质粒)。转染siRNA-LXRβ后,免疫荧光方法检测LXRβ和Iba1的表达水平;实时荧光定量PCR技术检测LXRβ、炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)、小胶质细胞M1型标记物(COX-2、iNOS、CD68)和M2型标记物(Arg-1、CD206)的mRNA水平表达。流式细胞术(flow cytometry)检测小胶质细胞M1型标记物(MHCⅡ、CD36)和M2型标记物(Arg-1、CD206)的表达水平。结果对BV2细胞分别转染24 h、48 h后发现,48 h的siRNA-LXRβ组的LXRβ蛋白及mRNA水平均显著低于NC组(P<0.001)。沉默LXRβ的表达后BV2细胞表现为胞体变圆变大,呈阿米巴样活化状态,炎症因子相关基因TNF-α、IL-6的mRNA表达水平显著升高(P<0.01),同时小胶质细胞M1型标记物(COX-2、CD68)和M2型标记物(Arg-1、CD206)的m RNA表达水平也显著升高(P<0.05);此外,流式细胞术结果显示沉默LXRβ的表达后小胶质细胞M1型标记物MHCⅡ、M2型标记物(Arg-1、CD206)在BV2小胶质细胞的比例中显著升高(P<0.01),同时M1/M2比率也明显增多(P<0.01)。结论沉默LXRβ表达后引起BV2小胶质细胞激活及炎症因子释放增多,促进BV2小胶质细胞向M1型、M2型转化,同时显著升高BV2小胶质细胞中M1/M2的比率。

• 出版日期2022
• 单位中国人民解放军陆军军医大学; 西南大学; 认知与人格教育部重点实验室