绿色木霉葡聚糖内切酶Ⅰ基因的定点突变及酶学性质的研究

作者：陈祺; 韦宇拓; 杜丽琴; 黄艳燕; 黄日波

来源：广西农业生物科学, 2008, S1: 1-7.

• 绿色木霉
• 葡聚糖内切酶Ⅰ
• 大肠杆菌
• 随机定点突变

将绿色木霉葡聚糖内切酶EGⅠ基因eg1亚克隆到表达载体pSE380,构建出重组质粒pSE380-eg1,转化到大肠杆菌JM109中表达,利用金属亲和层析对EGI进行纯化,纯化后的酶比活力达到3.8U/mg,其最适反应温度为48℃,最适pH为5.2。同时对EGⅠ的氨基酸残基G291位进行随机定点突变,筛选到一株突变酶G291S,其比活力为野生酶的2.2倍,Km值为野生酶的0.66倍,最适反应温度和最适反应pH值未发生改变。

• 出版日期2008-6-15
• 单位广西大学; 广西科学院