清热消炎宁抑制潜伏Ⅰ型单纯疱疹病毒激活的作用研究

作者：姜珊; 牛杰; 欧阳淑桦; 江涛; 彭红英; 罗卓; 栗原博; 李怡芳; 何蓉蓉^*

来源：药学学报, 2022, 57(06): 1641-1648.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2022-0249

• 情志应激
• 清热消炎宁
• 九节茶
• 肝郁化火
• Ⅰ型单纯疱疹病毒激活
• 铁死亡

本研究采用情志应激诱导的潜伏Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)复发的“肝郁化火”动物模型,研究清热消炎宁对HSV-1激活复发的作用及机制。实验方案经暨南大学动物实验伦理委员会批准,所有程序均严格按照动物使用和护理的伦理原则进行。实验分为正常组、潜伏组、激活组、清热消炎宁低剂量组(0.658 g·kg-1·day-1)、高剂量组(1.316 g·kg-1·day-1)和阳性药阿昔洛韦组(0.206 g·kg-1·day-1)。除正常组和潜伏组外,其他组小鼠在给药的第4天开始每天拘束12 h,连续拘束4天,在给药7天结束以后,记录小鼠的体质量变化和眼部炎症复发情况。乙醚麻醉小鼠后,取脑组织进行以下指标的检测:免疫组化实验方法检测HSV-1抗原分布情况;空斑法检测病毒滴度; RT-PCR法检测HSV-1相关病毒基因感染细胞多肽27 (ICP27)和糖蛋白B (gB)的表达水平; Western blot法检测HSV-1相关病毒蛋白ICP27和gB的表达、脂质过氧化产物4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平和铁死亡相关通路中花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)、铁蛋白转运受体1 (TFR1)、二价金属转运蛋白1 (DMT1)、谷胱甘肽过氧化酶4 (GPX4)和钙非依赖磷脂酶A2β (iPLA2β)蛋白表达水平;丙二醛(MDA)检测试剂盒检测另一脂质过氧化产物MDA的含量。实验结果显示,清热消炎宁能抑制情志应激诱导HSV-1激活复发小鼠体质量比的下降,降低眼部炎症复发率和脑组织HSV-1抗原分布和病毒滴度,显著下调HSV-1病毒基因ICP27和gB、病毒蛋白ICP27和gB的表达水平。此外,清热消炎宁还能明显抑制HSV-1激活复发小鼠脑组织中铁死亡通路正调节相关蛋白DMT1、TFR1和ALOX15的表达,并能减少脂质过氧化物产物4-HNE和MDA的水平。以上实验结果表明,清热消炎宁能抑制情志应激介导的HSV-1激活复发,其作用机制可能与干预铁死亡有关。本研究可为清肝泻火中药防治HSV-1激活复发感染导致的相关疾病的中医药防治提供理论依据。

• 出版日期2022
• 单位暨南大学; 广州白云山敬修堂药业股份有限公司