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摘要
目的 利用基因工程技术克隆和表达humanin基因。方法 人工合成humanin基因片段并克隆到原核表达载体pGEMEX 1和pet4 4a中。再将此等质粒转化至大肠杆菌 ,经过筛选鉴定获得高表达阳性克隆。结果 基因序列分析显示 ,humanin基因片段被成功地克隆到原核载体中 ;聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)显示 ,在异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)的诱导下 ,pGEMEX 1 humanin表达的融合蛋白的相对分子质量约为 2 80 0 0 ,融合蛋白含量占细菌表达蛋白总量的 4 0 % ;而pet4 4a humanin表达的融合蛋白的相对分子质量约为 6 30 0 0 ,融合蛋白表达量占细菌蛋白总量的 2 0 %。结论 利用基因工程技术可成功地克隆和表达humanin基因 ,并可获得高效表达。
- 出版日期2004
- 单位浙江大学医学院附属第一医院; 浙江大学; 神经内科
