停乳链球菌ISP基因的克隆与表达及其免疫原性研究

作者：李月颖; 朱松; 剧慧栋; 刘文青; 赵宝华; 裴艳涛

来源：河北师范大学学报(自然科学版), 2015, (02): 158-164.

DOI：10.13763/j.cnki.jhebnu.nse.2015.02.012

• 奶牛乳房炎
• 停乳链球菌
• isp基因
• 基因工程疫苗
• 免疫原性 bovine mastitis
• Streptococcus dysgalactia
• gene isp
• genetic engineering vaccine
• immunogenicity

根据GenBank报道的停乳链球菌免疫分泌蛋白基因(immunogenic secreted protein,ISP)序列设计引物,PCR扩增得到1 550bp的isp片段,其基因序列与GenBank提交序列的同源性为98.13%.将isp基因与表达载体pET-25b(+)连接,成功构建重组质粒pET-25b(+)-isp.转化大肠杆菌BL21(DE3),成功得到阳性表达重组菌株BL21(pET-25b(+)-isp).经IPTG诱导后,SDS-PAGE与Western blot检测得到约55ku的目的蛋白.经优化确定,isp蛋白的最优表达条件:1mmol/L IPTG,37℃诱导18h,且此...

• 出版日期2015
• 单位河北师范大学