木薯Linamarase基因的克隆、表达及酶学特性分析

作者：沈培峰; 付莉莉; 孙雪飘; 张家明

来源：中国农学通报, 2012, 28(12): 164-168.

DOI：10.3969/j.issn.1000-6850.2012.12.030

• 木薯
• 亚麻仁苷酶
• 生氰葡萄糖苷
• 重组蛋白
• SDS-PAGE

亚麻仁苷酶(Linamarase)是存在于木薯、巴豆等作物中的降解生氰葡萄糖苷Linamarin(亚麻仁苷)的酶,在结构上与芥子酶有很大的相似性,对它的研究有利于揭示生氰葡萄糖苷酶和芥子酶之间的关系以及芥子酶的起源问题。通过真核表达的方法,克隆了木薯Linamarase基因,构建酵母表达载体,转化毕赤酵母GS115,经诱导表达和亲和纯化,获得纯化的Linamarase重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量集中在71 kD左右。该酶最适反应温度在37℃左右,最适pH约为5。以pNPG为底物时,Km为1.70 mmol/L,最大反应速率Vmax为8.36μmol/(min.mg)。

• 出版日期2012
• 单位中国热带农业科学院热带生物技术研究所; 农业部; 海南大学