大鼠CRBP-1基因shRNA慢病毒载体的构建与测序

作者:陈波; 张志奇; 赵刚; 罗蒙; 孙勇伟; 李建平; 戴途; 吴志勇
来源:医学临床研究, 2008, (08): 1355-1357.
DOI:10.3969/j.issn.1671-7171.2008.08.005

摘要

【目的】构建测序大鼠视黄醇结合蛋白-1(CRBP-1)基因短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体。【方法】针对已经筛选确定的大鼠CRBP-1基因RNA干扰(RNAi)有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经Hpa I和Xho I酶切后的pGCL-GFP载体连接产生shRNA慢病毒载体,命名为Lv-shCRBP-1,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。【结果】PCR鉴定与DNA测序证实合成的Lv-shCRBP-1寡核苷酸链插入正确。【结论】成功构建大鼠CRBP-1基因shRNA慢病毒载体。

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