APE1shRNA重组质粒的构建及对人乳腺癌细胞生长的影响

作者：王忱; 多健; 史玉荣; 佟仲生

来源：实用肿瘤杂志, 2010, (05): 523-527.

DOI：10.13267/j.cnki.syzlzz.2010.05.007

• 乳腺肿瘤
• RNA
• 短发卡
• 脱嘌呤脱嘧啶核苷酸内切酶1
• 基因表达
• 逆转录聚合酶链反应
• 免疫印迹法 breast neoplasms
• RNA
• short hairpin
• Apurinic/Apyrimidinic Endonuclease 1
• gene expression
• reverse transcriptase polymerase chain reaction
• immunoblotting

目的设计构建靶向脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(APE1/ref-1)特异性短发卡RNA的真核表达载体,并转染人乳腺癌T47D细胞。方法设计、合成针对APE1的特异性的短链寡核苷酸,构建APE1特异性shRNA的重组质粒,稳定转染人乳腺癌T47D细胞;采用聚合酶链反应和免疫印迹法检测转染前后T47D细胞中APE1的表达。采用四甲基偶氮唑盐法观察T47D细胞的生长情况。结果经酶切和测序鉴定,成功构建APE1特异性shRNA的重组质粒,并能够转染T47D细胞。转染后,APE1在mRNA和蛋白水平表达分别下降约53.1%和60.5%,T47D细胞增殖活性受到抑制。结论运用pGenesil-1.1质粒载体构...

• 出版日期2010
• 单位天津医科大学