去铁酮与人有机阳离子转运体及有机阴离子转运体1体外相互作用研究

作者：孔思思; 涂美娟; 杨希; 赵垒; 周慧; 曾苏; 蒋惠娣

来源：浙江大学学报(医学版), 2014, 43(02): 129-134.

DOI：10.3785/j.issn.1008-9292.2014.03.001

• 酮类
• 铁螯合剂
• 质谱分析法
• 色谱法,液相
• 有机阳离子转运子
• 有机阴离子转运子1

目的:建立细胞裂解液中去铁酮测定的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,体外考察去铁酮与人有机阳离子转运体(hOCTs)及有机阴离子转运体1(hOAT1)的相互作用。方法:以Agilent Eclipse Plus C18柱(2.1 mm×50 mm,3.5μm)为分析柱;0.1%甲酸-水(v/v)和0.1%甲酸-乙腈(v/v)为流动相,梯度洗脱;应用电喷雾离子源(ESI源)、多反应监测(MRM)模式进行检测;应用稳定表达hOCTs及hOAT1的细胞模型(MDCK-hOCTs和MDCK-hOAT1)考察去铁酮对经典底物在细胞内积聚的影响;比较去铁酮在转空载体的mock细胞及MDCK-hOCTs中积聚的差异,以及经典抑制剂对其积聚的影响。结果:去铁酮在5300 nmol/L的浓度范围内线性关系良好;准确度大于94%,日内相对标准偏差小于2%。300μmol/L去铁酮使hOCTs经典底物MPP+在MDCK-hOCTs的积聚降低至阴性对照的70.4%87.1%;去铁酮在MDCK-hOCTs细胞和mock细胞中的积聚无明显差别,且经典抑制剂对去铁酮的积聚无明显抑制作用;100μmol/L去铁酮对hOAT1经典底物6-CF在MDCK-hOAT1细胞中的积聚无显著影响。结论:本实验建立的方法适用于细胞裂解液中去铁酮的定量分析;去铁酮对hOCT1和hOCT3有一定的抑制作用,对hOCT2和hOAT1则无明显抑制作用;hOCTs在去铁酮跨膜转运中不起主导作用。

• 出版日期2014
• 单位浙江大学