旋毛虫肌幼虫p53cDNA的克隆及鉴定

作者：孙树民; 吴秀萍; 王学林; 付宝权; 卢强; 李莲瑞; 郭恒; P.Boireau; 陈启军; 刘明远

来源：中国兽医学报, 2007, (04): 532-535.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2007.04.036

• 旋毛虫
• p53cDNA
• 克隆
• 表达
• 抗原性

根据GenBank中旋毛虫53000抗原基因的序列设计引物,用PCR技术直接从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因p53 cDNA,将其克隆到pMD-18T载体,转化至大肠埃希氏菌NovaBlue后测序分析,结果表明,克隆到1176bp的p53 cDNA,共编码391个氨基酸。序列分析表明,p53 cDNA序列与GenBank中的旋毛虫p53基因序列相比共有12个核苷酸发生改变,二者的同源性为98%,所编码蛋白质氨基酸序列的同源性为98%。将其克隆到原核表达载体pET28a并转化至表达菌BL21star(DE3),经IPTG诱导表达后获得约48000的重组蛋白。Western blotting检测证实,p53重组蛋白可以被旋毛虫感染猪血清识别,具有很好的抗原性。

• 出版日期2007
• 单位内蒙古民族大学; 吉林大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 动物科技学院