米曲霉(Aspergillus oryzae FAFU)淀粉酶的分离纯化及其酶学性质研究

作者：贾瑞博; 胡荣康; 周文斌; 刘斌; 饶平凡; 倪莉; 陈绍军; 田玉庭; 吕旭聪

来源：食品与发酵工业, 2016, 42(11): 71-76.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201611012

• 米曲霉
• 淀粉酶
• 分离纯化
• 酶学特性

从米曲霉(Aspergillus oryzae FAFU)发酵产物中提取淀粉酶,通过硫酸铵盐析、透析、DEAE-Sepharose离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶柱层析等纯化步骤,回收活性组分,结合十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行纯度鉴定,共分离纯化出3种酶:酶Ⅰ、酶Ⅱ、酶Ⅲ。通过酶解淀粉实验,酶解产物经薄层层析(TLC)分析,鉴定出酶Ⅰ、酶Ⅱ为液化酶,酶Ⅲ为糖化酶,经SDS-PAGE电泳确定分子量大小分别为:48.6、49.7、93.5 k Da。对酶Ⅰ、酶Ⅱ的酶学性质进行初步的探究:酶Ⅰ的最适反应温度为50℃,温度在50℃以下稳定性好,55℃的半衰期是40 min,最适反应p H为6.0,在p H7.29.6范围内稳定性好;酶Ⅱ的最适反应温度为50℃,温度在45℃以下稳定性好,50℃的半衰期是30 min,最适反应p H为6.6,在p H8.610.0范围内稳定性好。

• 出版日期2016
• 单位福州大学; 福建农林大学; 国家菌草工程技术研究中心