淀粉液化芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆及表达

作者：李永仙; 谢焱; 朱林江; 张一心; 顾国贤; 李崎

来源：生物工程学报, 2009, (04): 542-548.

DOI：10.13345/j.cjb.2009.04.006

• 淀粉液化芽孢杆菌
• &beta
• -1
• 3-1
• 4-葡聚糖酶
• 克隆表达
• 大肠杆菌

为了比较不同的表达系统对β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因(bgl)的效果,本研究将高产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amylolique faciens BS5582的bgl基因(GenBank Accession No.EU623974)克隆到3种不同的质粒载体中,即构建pEGX-4T-1-bgl、pET20b(+)-bgl和pET28a(+)-bgl重组质粒。比较了pEGX-4T-1-bgl在不同Escherichiacoli宿主中表达效果,以及pET20b(+)-bgl和pET28a(+)-bgl在E.coliBL21(DE3)中的表达效果。结果表明,E.coliBL21(DE3)-pET28a(+)-bgl能够表达最高的重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶活,其总酶活可达(322.0±8.8)U/mL,是出发菌在最适摇瓶发酵条件下产酶活的40.1%。对该重组菌的产酶条件进行了分析,结合IPTG和乳糖协同的诱导作用,在基础产酶培养基中产最高总酶活为(1883.3±45.8)U/mL,表明其具有良好的工业应用价值。

• 出版日期2009-4-25
• 单位江南大学