摘要

以大豆细胞质雄性不育系配套保持系材料(JLCMS1)的黄化苗为材料,纯化得到线粒体。低熔点琼脂糖包埋线粒体成胶块,消化裂解后用HindⅢ部分酶切,通过脉冲场电泳回收40~60 kb酶切片段。将回收产物连接到载体pIndigo-BAC 5,通过电击转化大肠杆菌DH10B感受态细胞,获得的BAC文库包含2 000个单克隆,平均插入片段大小约为50 kb,约覆盖大豆线粒体基因组250倍以上。