龙杞方治疗糖尿病肾脏病的作用机制：基于网络药理学和大鼠验证实验

摘要

目的 基于GEO数据库和网络药理学方法研究龙杞方治疗糖尿病肾脏病（DKD）的作用机制，并通过动物实验进一步验证龙杞方治疗DKD的信号通路。方法 利用GEO、TCMSP、CNKI、ChemDraw、SwissTarget Prediction等数据库获得龙杞方和DKD靶点，VENNY获得龙杞方-DKD交集靶点，String进行蛋白互作分析，R包进行KEGG和GO富集分析，Cytoscape 3.7.2软件构建网络图。动物实验验证分析，40只健康雄性SD大鼠随机分为5组（8只/组），采用腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）诱导的DKD大鼠模型，龙杞方低剂量组(1 g·kg-1·d-1)，龙杞方中剂量组(2 g·kg-1·d-1)，龙杞方高剂量组(2 g·kg-1·d-1)，空白组和模型组采用等体积水灌胃；HE染色观察大鼠肾脏形态，检测肾功能情况；Western blot检测炎症指标NF-κB、p-NF-κB蛋白表达水平。结果 龙杞方共760个主要靶点，通过GEO数据库获得差异基因共1026个，通过VENNY数据库获得龙杞方-DKD交集靶点共61个，通过PPI网络互作获得的核心靶点为MYC、EGF、CASP3、VEGFA、CCL2、SPP1、VCAM1、ICAM1。GO分析龙杞方主要与核受体活性、配体激活转录因子活性等有关，KEGG发现龙杞方主要通过干预NF-κB、TNF、PI3K-AKT等炎症信号通路有关。动物实验显示龙杞方高、中、低剂量干预后DKD大鼠的肾功能指标（Scr、BUN、UALB、UACR）与模型组比较有显著改善（P中剂量组>低剂量组；Western blot结果显示龙杞方高、中、低剂量干预DKD大鼠，与模型组比较，可以使NF-κB、p-NF-κB表达显著下调，效应强度为：龙杞方高剂量组>中剂量组>低剂量组。结论 龙杞方通过多成分、多靶点、多信号通路治疗DKD，龙杞方可能通过抑制炎症信号通路NF-κB起到保护肾功能的作用。

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