口蹄疫病毒A型SAP突变毒株的构建及其生物学特性的测定

作者：杨洋; 杨帆; 杨波; 郑海学

来源：中国兽医科学, 2014, 44(10): 1003-1007.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2014.10.002

• A型口蹄疫病毒
• 反向遗传操作
• SAP突变
• 病毒拯救

为了获得对牛和猪低致病性或无致病性的口蹄疫(FMD)疫苗毒株,提高疫苗毒株的生物安全性,选择口蹄疫病毒(FMDV)L蛋白酶编码基因SAP区域进行突变。利用反向遗传操作技术,构建FMDV SAP区域突变的A型病毒重组质粒prA-SAP-FMDV。利用脂质体将构建的重组质粒转染BHK21细胞,重组质粒能够致细胞病变(CPE)。连续传代后,经RT-PCR鉴定和间接免疫荧光试验等,SAP突变的重组病毒rA-SAP-FMDV被成功拯救。另外,比较测定了该重组毒与亲本毒rA-WT-FMDV对BHK21细胞和乳鼠的致病性;结果显示,rA-SAP-FMDV的TCID50/mL为10-7.17,LD50为10-6.5/0.2mL,与亲本毒株的生物学特性相似。这一突变SAP域的A型FMDV的获得为研发生物安全性高的A型FMD疫苗奠定了基础。

• 出版日期2014
• 单位家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部