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摘要
目的:探讨ANLN基因在肝内胆管癌组织中的表达情况以及在胆管癌细胞增殖中的作用及机制。方法:收集手术切除的40例肝内胆管癌患者癌组织及癌旁组织,采用RT-PCR、Western blot以及免疫组化的方法检测组织中ANLN mRNA和蛋白表达水平,比较ANLN在肝内胆管癌组织与癌旁组织中的表达差异,分析其与肿瘤分期及肿瘤大小的关系。使用小干扰RNA建立ANLN低表达HUCCT1细胞系,行CCK8、平板克隆以及流式细胞检测观察ANLN对胆管癌细胞体外增殖能力的影响。行String软件预测与ANLN相关的蛋白,行RT-PCR、Western blot方法检测两者间的相关性以及周期蛋白CyclinD1表达差异。结果:Western blot和RT-PCR显示ANLN在肝内胆管癌组织中高表达。临床数据分析显示ANLN的表达与肝内胆管癌患者的肿瘤大小及TNM分期密切相关,并且ANLN表达高的患者预后较差。利用小干扰RNA(siRNA)下调ANLN能有效抑制胆管癌细胞的增殖能力。Western blot实验证明下调ANLN导致周期蛋白Cyclin D1、Cyclin A表达明显减少。String预测ANLN与TPX2相关,经Western blot和RT-PCR得到验证。结论:ANLN可能通过TPX2调节肝内胆管癌细胞的增殖能力,促进肝内胆管癌的发展,这可为肝内胆管癌的治疗提供新靶点。
- 出版日期2019
- 单位南京医科大学第一附属医院; 海南省肿瘤医院
