拷贝数对毕赤酵母重组菌表达猪胰岛素前体的影响

作者：陈丽; 郭美锦; 储炬; 庄英萍; 张嗣良

来源：化学与生物工程, 2011, (02): 63-67.

• 重组毕赤酵母
• 猪胰岛素前体
• 拷贝数
• 生理特性 recombinant Pichia pastoris
• porcine insulin precursor
• copy number
• physiological characterization

通过5 L发酵罐补料分批培养,分析了猪胰岛素前体(PIP)基因拷贝数对毕赤酵母生长、细胞存活率和基因稳定性的影响。结果表明,在甘油阶段和甲醇诱导初期拷贝数对毕赤酵母的生长无显著影响,但在甲醇诱导24 h后高拷贝数毕赤酵母菌株(12拷贝重组菌A2和18拷贝重组菌A3)的比生长速率明显比低拷贝数菌株(1拷贝重组菌G1和6拷贝重组菌G6)的比生长速率慢,A3菌株细胞存活率仅为78%,且其外源基因丢失率高达19.4%;4种拷贝数毕赤酵母重组菌中,12拷贝重组菌A2的PIP蛋白产量最高,为702 mg.L-1。

• 出版日期2011
• 单位华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室