牛骨骼肌卫星细胞的分离培养及诱导分化方法的建立

作者：兴孝友; 佟慧丽; 李树峰; 严云勤

来源：黑龙江畜牧兽医, 2012, (11): 10-14+180.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2012.11.001

• 牛
• 骨骼肌卫星细胞
• 分离
• 培养
• 鉴定
• 诱导分化 bovine
• skeletal muscle satellite cells
• isolation
• culture
• identification
• induced differentiation

为了给牛骨骼肌卫星细胞的分离培养及诱导分化方法及进一步揭示肌肉分化的机理及转基因肉牛的研究提供重要帮助,试验以新生胎牛的骨骼肌为试验材料,分别采用胶原酶Ⅰ和胶原酶Ⅺ与胰蛋白酶结合对其进行消化,并通过差速贴壁法对骨骼肌卫星细胞进行分离纯化,同时采用免疫荧光染色、RT-PCR、Western-blot法对骨骼肌卫星细胞进行鉴定。结果表明:研究成功获得了大量的牛骨骼肌卫星细胞;该细胞的标志性分子的mRNA及其蛋白表达的纯度在98%以上;细胞生长状态良好,可稳定传至90代并保持旺盛的增殖活力;细胞分化效率高,2%的马血清能够诱导细胞分化使其融合形成多核肌管,数量众多的肌管可自发融合为更粗的肌管,并可观...

• 出版日期2012
• 单位东北农业大学