胆甾醇修饰的PEG-P[Asp(DET)]/miRNA复合物的制备、理化性能及细胞摄取能力

作者：马志强; 刘赣; 高红军; 吴姗; 贾婷婷; 钟延强; 史林启

来源：第二军医大学学报, 2014, (02): 171-176.

• 高分子胶束复合物
• 聚乙二醇-聚{氮-[氮-(2-氨乙基)-2-氨乙基]天冬氨酸}
• 微mRNAs
• 基因传递系统
• 基因疗法

目的制备疏水基修饰的聚阳离子高分子基因载体PEG-P[Asp(DET)]-10%胆甾醇,对其复合miRNA的理化性质和细胞摄取能力进行研究。方法开环聚合合成PEG-P[Asp(DET)],再采用氯甲酸胆甾醇基进行疏水修饰,核磁共振法验证其结构;使其与hsa-miR-15a形成胶束复合物,对该胶束复合物的粒径、Zeta电位、稳定性、包封率以及细胞毒性进行考察;以白血病细胞K562细胞系为模型细胞进行体外细胞实验对其摄取进行考察。结果合成的PEG-P[Asp(DET)]-10%胆甾醇具有良好的溶解性,可与miRNA形成稳定的胶束复合物,当氮磷比(N/P)=20,基因浓度在5μmol/mL时,形成的胶束复合物粒径为(192.4±10.8)nm,Zeta电位为(6.9±0.9)mV,包封率为(90.5±3.2)%。该复合物在实验条件下表现出了相当的稳定性,细胞对该复合物的摄取能力明显强于商品化试剂脂质体lipo2000。结论 PEG-P[Asp(DET)]-10%胆甾醇是一种优良的高分子基因传递系统载体,在体外实验中可有效实现细胞对于miRNA的稳定摄取。

• 出版日期2014
• 单位中国人民解放军第二军医大学; 南开大学