摘要

目的:建立一种新的高效液相色谱法测定人全血中羟氯喹的浓度,并对方法进行优化。方法:取300μL全血样本,加入25μg·mL~(-1)甲硝唑溶液10μL作为内标,用900μL乙酸乙酯进行液液萃取,氮气吹干后用流动相200μL复溶,取20μL上清液进样。使用Symmetry~? C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离,以20 mmol·L~(-1)磷酸二氢钾-乙腈(85∶15,v/v,磷酸调pH=3.0)为流动相,流速:0.8 mL·min~(-1),柱温:35℃,检测波长:254 nm。考察该方法的特异性、标准曲线、精密度、准确度、稳定性和提取回收率。结果:羟氯喹在100~5 000 ng·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好,标准曲线方程为f=0.03×10~(-1) C-0.12×10~(-1)(r=0.999 6);日内、日间精密度RSD均小于4.0%,准确度高于85%,全血样品提取回收率为(78.08±5.32)%(n=5)。结论:本方法灵敏度高、选择性高、操作简洁、检测时间短、结果准确可靠,能够满足检测人血中羟氯喹浓度的需求,经优化后缩短了检测时间,提升了检测效率,适合于临床诊疗监测及药效学研究。