大肠埃希菌内锌离子对断裂内含肽Npu DnaE自剪接作用的抑制效应

作者：许嫣然; 张蕾; 窦同璐; 陈俊升; 朱建伟

来源：中国医药工业杂志, 2018, 49(05): 608-613.

DOI：10.16522/j.cnki.cjph.2018.05.011

• 大肠埃希菌
• 内含肽
• 锌离子
• 自剪接
• 抑制

内含肽是前体未成熟蛋白质中的一段具有自我剪接功能的序列,其活性受多种因素影响,如锌离子浓度的控制。为了在大肠埃希菌胞内实现天然断裂型内含肽Npu DnaE"自剪接"作用可控,表达了Npu DnaE内含肽C-末端和人Ig G1抗体Fc段融合蛋白,及Npu DnaE内含肽N-末端和铜绿假单胞菌外毒素(PE)截短型融合蛋白,并加入浓度由1 mmol/L增加至2.5 mmol/L的锌离子。结果大肠埃希菌的生长没有受到影响,Fc蛋白和PE蛋白的单独表达没有受影响,而内含肽N-末端和C-末端发生剪接作用后,外显肽Fc和PE融合蛋白的表达量显著降低。上述结果表明,在大肠埃希菌表达富含半胱氨酸目的蛋白时添加锌离子,可以有效地抑制胞内Npu DnaE内含肽的"自剪接"作用,为拓展内含肽在生物药物生产中的应用提供了试验依据。

• 出版日期2018
• 单位上海交通大学